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实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
甘油三酯(TG)含量测试盒微量法 | 100管/96样 | 微量法 | BK-01S6647 |
商品介绍:
测定意义: TG是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,是体内能量的主要来源。血清甘油三酯/三酰甘油(TG)是一项重要的临床血脂常规测定指标,特别是随着对其致动脉粥样硬化(AS)作用研究的深入,TG作为冠心病的一项独立的危险因素日益受到重视。 测定原理 血清中加入异丙醇抽提取甘油三酯,经KOH皂化使甘油三酯水解生成甘油及脂肪酸,甘油在过碘酸作用下氧化成甲醛,在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色的3,5二乙酰,1,4二氢甲基吡啶,其颜色的深浅与甘油三酯的含量成正比。 实验中所需仪器及设备 可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水 |
试剂组成和配制:
提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步骤:
1. 样品的准备:
a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。
b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。
d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。
e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。
2. 试剂盒的准备工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。
b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。
2 ug pBAD43 pBAD43 低温运输,-20℃保存
50次 沉淀法miRNA分离试剂盒 miRNA Isolation Kit 4℃保存
2 ug pCMV-Flag-C pCMV-Flag-C 低温运输,-20℃保存
20次 DNA去化试剂盒 DNA Dephosphorylation Kit -20℃保存
10g 1:10000 Pepsin 1:10000 室温保存
50T 人基质金属蛋白基因PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
100μL Camptothecin Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
250mL Citrate Buffer(柠檬酸盐缓冲液),0.5M,pH3.0 Citrate Buffer,0.5M,pH3.0 常温保存
5次 TdT加尾法DNA辛标记试剂盒 TdT-Tailing DNA Labeling Kit Series -20℃保存
2 ug pKC1139 pKC1139 低温运输,-20℃保存
细菌L型增菌液 Bacterial L-growing Broth 65g
甘油三酯(TG)含量测试盒微量法Mouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的小鼠抗人IgM 规格: 0.1mlBNP 脑钠素/利钠肽抗体 规格: 0.2ml
C2orf24 2号染色体开放阅读框24抗体 规格: 0.2mlPerilipin A+B 脂滴包被蛋白A+B抗体 规格: 0.2ml
RGS5 G蛋白信号转导调节因子5抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-Monkey IgM/Cy3 Cy3标记的兔抗猴IgM 规格: 0.1ml
Phospho-PKM2 (Tyr105) 磷酸化丙酮酸激M2抗体 规格: 0.1mlphospho-B-Raf (Thr597) 磷酸化B-Raf抗体 规格: 0.1ml
phospho-C-Myc(Thr358) 磷酸化致基因C-Myc抗体 规格: 0.1mlCripto-1 畸胎瘤衍化生因子抗体(C端) 规格: 0.1ml
phospho-PI3 Kinase p110 beta(Ser1070) 磷酸化磷脂酰肌醇激(PI3Kβ)抗体 规格: 0.1mlREF-1/APEX1 多功能DNA修复抗体 规格: 0.1ml
Phospho-PDGFRA(Tyr1018) 磷酸化小板源性生因子受体-α抗体 规格: 0.1mlphospho-PKC delta (Ser645) 磷酸化蛋白激C亚性D型抗体 规格: 0.1ml
GM-CSFR alpha/CD116/CSF2RA 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子受体α抗体 规格: 0.2mlVHLH/Von Hippel Lindau 脑视网膜管瘤G7蛋白抗体(逢希伯-林道氏) 规格: 0.2ml
HACE1 E3泛素蛋白连接HACE1抗体 规格: 0.2ml
OPN/BSP 骨桥蛋白抗体(分泌型磷蛋白1)人 规格: 0.1ml
CPXCR1 瘤/睾抗原77抗体 规格: 0.2ml
Delta Catenin δ连环蛋白/δ连环素/δ链接素抗体(δ-catenin) 规格: 0.2ml
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