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产品名称 | 载脂蛋白EApoE试剂盒 |
检测方法 | 免疫浊度法 |
规格 | R1:45ml×2 R2:30ml×1 |
货号 | BK-S64097 |
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
DPYS Others Human 人 DPYS / Dihydropyrimidinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 抑氨肽酶(进口)质量规格:>99%,美国进口sc-202975Bestatin,Ubenimex
人软骨细胞HC-a高藜芦酸(标准品)质量规格:HPLC≥98.0%(3,4-Dimethoxyphenyl)acetic acid
罗猴胎肾细胞;MA104 脑胶质瘤细胞,C6细胞 NCI-H446 [H446](小细胞肺癌细胞)二乙酰一1(>98%,BR)质量规格:>98%,BRDiacetyl monoxime
人前列腺癌细胞;DU 145 [DU145;DU-145]马来酸二乙酯(>98%,BR)质量规格:>98%,BRDiethyl maleate
TNFRSF14 Others Mouse 小鼠 HVEM / TNFRSF14 人细胞裂解液 (阳性对照) 二氢细胞弛素(>98%,BR)质量规格:>98%,BRDihydrocytochalasin B
WM35, 人色素瘤细胞胸腺五肽质量规格:>98%Thymopentin Acetate
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Zhejiang/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸噻加宾 质量规格:≥99.0%,BRTiagabine HCl
人皮肤成纤维样细胞;HSF2特比萘芬质量规格:>98.5%Terbinafine
豹猫皮肤成纤维样细胞;LCS5 大鼠肝细胞,BRL 3A细胞 NBLE细胞,新生牛眼晶体上皮细胞特比萘芬(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Terbinafine
人正常前列腺上皮细胞;RWPE-1盐酸特比萘芬质量规格:>99%,EP6Terbinafine HCl
KM小鼠未分化神经胶质瘤瘤株;B22草酸脱氢氨氯地平质量规格:美国进口Dehydro Amlodipine Oxalate
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr 腹水瘤细胞,S-180细胞 SVEC4-10细胞,小鼠结血管上皮样细胞(R)-氨氯地平质量规格:美国进口(R)-Amlodipine
人永生化表皮细胞;HaCaT阿瑞匹坦-标记d4质量规格:美国进口Aprepitant - Labeled d4
CTLA4 Others Mouse 小鼠 CTLA4 / CD152 人细胞裂解液 (阳性对照) 阿瑞匹坦-M3代谢物质量规格:美国进口Aprepitant-M3 Metabolite
猞猁皮肤成纤维样细胞;ELS1OSI-420,游离碱(去甲埃罗替尼)质量规格:美国进口OSI-420, Free Base (Desmethyl Erlotinib)
载脂蛋白EApoE试剂盒人上皮细胞总RNAHMEpiC NA聚酰胺粉(柱层析用,10-30目)Polyamide质量规格:柱层析用,10-30目
CTSL1 Others Mouse 小鼠 CTSL / Cathepsin-L 人细胞裂解液 (阳性对照) 1酸氢二钠,二水(for HPLC, ≥99%(T)) phosphate dibasic dihydrate质量规格:for HPLC, ≥99%(T)
HCT-15 人结肠癌细胞无水硫酸钠(农残级) sulfate anhydrous质量规格:农残级
CL-0401NCI-H446(人小细胞肺癌细胞)5×106cells/瓶×2无水硫酸钠(for HPLC,≥99.0%(T)) sulfate anhydrous质量规格:for HPLC,≥99.0%(T)
MSC, 小鼠雪旺细胞碳酸氢钠(for HPLC,≥99.0%) bicarbonate质量规格:for HPLC,≥99.0%
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加*。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
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