巴贝斯属虫通用PCR检测试剂盒说明书

技术原理：
 DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
       在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
       发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

QGY-7703(人肝细胞)5×106cells/瓶×2gersion

人胎盘绒毛细胞英文名称：JAR

屎肠球菌 Enterococcus faecium谷氨酸棒杆菌 Corynebacterium glutamicum

DG-18琼脂/Dichloranglycerol Agar食品中霉菌和酵母菌分离培养250克国产/进口

改良沙氏琼脂培养基/Sabouraud′s Agar，Modified真菌检测250克国产/进口

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae温特曲霉 Aspergillus wentii

异常毕赤酵母 Pichia anomala小鼠肺大动脉内皮细胞*培养基

尼氏(Nissl)染色规格：

内皮脂肪酶(LIPG)重组蛋白英文名称：Recombinant Lipase, Endothelial (LIPG)

MDA-MB-231(人腺细胞)5×106cells/瓶×2

BPL琼脂/BPL Agar食品中沙门氏菌选择性分离培养250克国产/进口

巴贝斯属虫通用PCR检测试剂盒说明书HCCLM3(人高转移肝细胞)5×106cells/瓶×2

SNU-5(人胃细胞)5×106cells/瓶×2

人非小细胞肺细胞  NCI-H358

小鼠畸胎瘤细胞  P19

汤琼脂培养基/Broth Agar Medium药品卫生检验，细菌数测定，无菌试验250克国产/进口

假单胞分离琼脂/Pseudomonas Isolation Agar假单胞菌群的测定250克国产/进口

PYG液体培养基基础/PYG Broth Base双岐杆菌增菌培养250克国产/进口

人肺动脉成纤维细胞*培养基100mL

大鼠肝动脉平滑肌细胞*培养基100mL

小鼠角膜上皮细胞*培养基100mL

酪蛋白琼脂 规格： 100g 用途： 用于鉴别蜡样芽孢杆菌分解酪蛋白试验 (GB/T4789.28-2003中4.65，GB/T4789.14-2003)。

西蒙氏柠檬酸盐培养基 规格： 100g 用途： 用于肠道菌的柠檬酸盐利用试验

半糖凝集素8(GAL8)重组蛋白  Recombinant Galectin 8 (GAL8)

花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)重组蛋白  Recombinant Arachidonate-15-Lipoxygenase (ALOX15)

热休克蛋白40(HSP40)重组蛋白  Recombinant Heat Shock Protein 40 (HSP40)

盐皮质激素受体(MR)重组蛋白  Recombinant Mineralocorticoid Receptor (MR)